正常人血清真菌d葡聚糖正常值是多少，怎么辦？

一、正常人血清真菌d葡聚糖正常值是多少，怎么辦？

正常值是10-50pg/mi。醫院所采用的儀器及方法不一樣數值也會有一些偏差，如果出現經常性的頭疼或者低燒之類的癥狀有可能是真菌感染。建議盡早咨詢醫生入院治療，平時也可以通過慢跑，騎自行車等一些方法來進行運動。在飲食上面可以多吃一些牛奶及雞蛋等一些蛋白質之類的食物。

二、比較病毒、細菌和真菌的主要特征，并填入下表． 項目 病毒 細菌 真菌 觀察所用儀器

細菌的基本結構有細胞壁、細胞膜、細胞質和DNA集中的區域，沒有成形的細胞核；真菌的基本結構有細胞壁、細胞膜、細胞質、細胞核，液泡，沒有葉綠體；病毒沒有細胞結構，主要由內部的核酸和外部的蛋白質外殼組成，不能獨立生存，只有寄生在活細胞里才能進行生命活動．細菌進行分裂生殖、真菌進行孢子生殖，病毒只能進行遺傳物質的自我復制．因此細菌、真菌、病毒共有的特征是不含葉綠體．病毒必須借助電子顯微鏡才能觀察清楚；細菌必須借助高倍顯微鏡才能觀察到；真菌利用普通顯微鏡或肉眼就能觀察到．

故答案為：

三、真菌細菌放線菌的三個菌種斜面標簽模糊,在不借助顯微鏡的情況下如何用肉眼鑒

僅憑肉眼，不借助顯微鏡等儀器是無法看見細菌，真菌，放線菌等微生物的。

大多數真菌都是肉眼看不見的，但也有一些大型真菌，如森林中的蘑菇，樹干、枯枝上的苔蘚是我們能看得見的。當一個真菌大到能用肉眼看見時，我們就不再稱其為微生物了。比如，有一種生長在美國密歇根州的真菌——奧氏蜜環菌，能長到10噸重，覆蓋范圍可達16萬平方米。它實在太大了，是真正的“真菌巨無霸”！

細菌是一種特別小的微生物，人用肉眼是沒有辦法看到的。細菌的種類也是特別的多，既包括一些有益的細菌，也包括一些有害的細菌，有一些細菌是造成人體出現疾病的重要的原因，比如說鼠疫，肺結核，林病等等，細菌的形態也是多種多樣，如果想要看到細菌需要用顯微鏡，需要進行細菌培養等。

細菌最早是被荷蘭人列文虎克（AntonievanLeeuwemhoek，1632-1723）在一位從未刷過牙的老人牙垢上發現的，但那時的人們認為細菌是自然產生的。直到后來，巴斯德用鵝頸瓶實驗指出，細菌是由空氣中已有細菌產生的，而不是自行產生，并發明了“巴氏消毒法”，被后人譽為“微生物之父”

四、黃曲霉毒素檢測卡哪家質量比較穩定？

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五、真菌的DNA提取方法有哪些，要詳細操作步驟

（一）

1.取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉

2.加入4mL提取液，快速振蕩混勻

3.加入等體積的4mL的氯仿:異戊醇(24:1)，渦旋3～5min（此處是粗提沒有加酚，可以節約成本的喲?。?/p>

4.1000rpm，4℃，5min

5.上清用體積的氯仿:異戊醇(24:1)再抽提一次（10,000 rpm，4℃離心5 min）

6.取上清，加入2/3倍體積的-20℃預冷異丙醇或2.5倍體積的無水乙醇沉淀, 混勻, 靜置約30 min

7.用毛細玻棒挑出絮狀沉淀, 用75%乙醇反復漂洗數次, 再用無水乙醇漂洗1次, 吹干，重懸于500 ulTE中

8.加入1 ul RNaseA （10 mg/mL），37℃處理1 hr

9.用酚（pH8.0）:氯仿:異戊醇(25:24:1)和氯仿:異戊醇(24:1)各抽提1次（10,000 rpm，4℃離心5 min）

10.取上清，1/10V 3M NaAc,2.5V體積的無水乙醇, -70℃沉淀30 min以上

11.沉淀用75%乙醇漂洗，風干, 溶于200 ulTE中，-20 ℃保存備用

DNA提取液：0.2M Tris-HCl（pH 7.5），0.5M NaCl，0.01M EDTA，1％SDS，

3M NaAc

（二）

1.真菌菌絲0.5-1 g, 在液氮中迅速研磨成粉

2.加入3 mL 65℃預熱的DNA提取緩沖液，快速振蕩混勻65℃水浴30 min, 期間混勻2-3次

3．加入1 mL 5M KAc，冰浴20 min

4．等體積的氯仿:異戊醇(24:1)抽提1次（10,000 rpm，4℃離心5 min）

5．取上清，加入2/3倍體積的-20℃預冷異丙醇, 混勻, 靜置約30 min

6．用毛細玻棒挑出絮狀沉淀, 用75%乙醇反復漂洗數次, 再用無水乙醇漂洗1次, 吹干，重懸于500 L TE中

7．加入1 ul RNaseA （10 mg/mL），37℃處理1 hr

8．用酚（pH8.0）:氯仿:異戊醇(25:24:1)和氯仿:異戊醇(24:1)各抽提1次（10,000 rpm，4℃離心5 min）

9．取上清，1/10V 3M NaAc,2.5V體積的無水乙醇, -70℃沉淀30 min以上

10．沉淀用75%乙醇漂洗，風干, 溶于200 ul TE中，-20 ℃保存備用。

1.真菌菌絲0.5-1 g, 在液氮中迅速研磨成粉

2.加入3 mL 65℃預熱的DNA提取緩沖液，快速振蕩混勻65℃水浴30 min, 期間混勻2-3次

3．加入1 mL 5M KAc，冰浴20 min

4．等體積的氯仿:異戊醇(24:1)抽提1次（10,000 rpm，4℃離心5 min）

5．取上清，加入2/3倍體積的-20℃預冷異丙醇, 混勻, 靜置約30 min

6．用毛細玻棒挑出絮狀沉淀, 用75%乙醇反復漂洗數次, 再用無水乙醇漂洗1次, 吹干，重懸于500 L TE中

7．加入1 ul RNaseA （10 mg/mL），37℃處理1 hr

8．用酚（pH8.0）:氯仿:異戊醇(25:24:1)和氯仿:異戊醇(24:1)各抽提1次（10,000 rpm，4℃離心5 min）

9．取上清，1/10V 3M NaAc,2.5V體積的無水乙醇, -70℃沉淀30 min以上

10．沉淀用75%乙醇漂洗，風干, 溶于200 ul TE中，-20 ℃保存備用。

DNA提取緩沖液：100 mM Tris-HCl（pH8.0）,20 mM EDTA（pH8.0）,1.5 M NaCl, 2% CTAB(W/V),4% PVP40(W/V)和2% 巰基乙醇(V/V)，PVP和巰基乙醇使用前加入

5M KAc

真菌的DNA提取方法：

一、SDS法

基本原理是研磨的組織細胞用熱的SDS裂解后，加入高濃度的KAc，0℃放置以除去蛋白和多糖類雜質，最后用乙醇或異丙醇沉淀。

1、 試劑

(1)提取緩沖液

Tris-HCl 100mmol/L（pH8.0） EDTA 50mmol/L （pH8.0） NaCl 500 mmol/L 滅菌后加β-巰基乙醇至10 mmol/L

(2)裂解液20%SDS

(3)高鹽溶液5mol/L KAc

(4) RNaseA 10mg/ml

(5) 異丙醇

(6)滅菌ddH2O或TE

2、 儀器

離心機， 恒溫水浴, 臺式高速離心機，電泳裝置

3、實驗程序

（1）、離心菌體，再用滅菌ddH2O沖洗2次，放入經液氮預冷的研缽中，加入液氮研磨至粉末狀，用干凈的滅菌不銹鋼勺轉移粉末到加有500μL提取液的離心管中,輕輕混勻。

（2）、 向管中加入50μL20%SDS溶液，混勻，不可過于強烈震蕩以防基因組DNA斷裂 ，65℃保溫10min，并不時搖動。

（3）、 加入150μL 5mol/L KAc，混勻，置冰上20-30 min。

（4）、 4℃,15 000rpm離心15min,轉移上清到另一離心管中，加入0.7V的異丙醇，混勻，-20℃沉淀30 min 。

（5）、12 000rpm離心10min回收基因組DNA沉淀，吹干后加入適量的滅菌ddH2O或TE溶解DNA。

（6）、 加入1/10體積的RNaseA，37℃保溫20min，除去RNA。

（7）、 C：I抽提后，加2V乙醇，-20℃沉淀30 min 。12 000rpm離心10min回收基因組DNA沉淀。

（8）、 用400μL 70%乙醇洗一次后，吹干，加入適量的滅菌ddH2 O或TE溶解DNA。

（9）、 電泳檢測完整性。

二、蝸牛酶破壁法

（一）、試劑：

1、500 μL PBS（0.01 mo l/L N a2 HPO4 和N aH2 PO4, pH7.0, 0.15 mol /L NaCl）

2、蝸牛酶溶液中（0.1 mo l/L 磷酸緩沖液, pH7.4, 0.25mo l/L MgC12用0.22 μm 細菌濾膜過濾除菌）

3、裂解液（2% Triton X-100, 1 % SDS, 0.1 mol/L NaCl，10 mmol/L T 、Tris-HCl，pH8.0, 1mmol /L EDTA）

4、5mol/L KAc( pH 8.9)

（二）、實驗程序

1、離心菌體，沉淀中加入500 μL PBS（0.01 mo l/L N a2 HPO4 和N aH2 PO4, pH7.0, 0.15 mol /L NaCl）重懸, 12 000 r /m in 離心2 m in; 棄上清, 重復懸浮一次

2、沉淀溶于100 μL 含20 mg /mL 的蝸牛酶溶液中（0.1 mo l/L 磷酸緩沖液, pH7.4, 0.25mo l/L MgC12用0.22 μm 細菌濾膜過濾除菌）

3、45℃ 作用2 h

4、加100 μL 裂解液（2% Triton X-100, 1 % SDS, 0.1 mol/L NaCl，10 mmol/L T 、Tris-HCl， pH8.0, 1mmol /L EDTA）

5、- 20℃ 冷凍, 然后室溫震蕩溶解, 反復3次

6、向懸浮液中加入150 μL 5mol/L KAc( pH 8.9)輕輕混勻

7、10 000 r/min離心5 min; 將上清轉移到一新的1.5 mL離心管中

8、乙醇沉淀