怎樣利用PI單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡？

一、怎樣利用PI單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡？

一、基本原理

流式細胞儀檢測細胞凋亡：PI單染色法其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等。

二、試劑與儀器

1、PBS溶液

2、PI染液：將PI溶于PBS（pH7.4）中，終濃度為100ug/ml。用棕色瓶4℃避光保存

3、70%乙醇

4、400目篩網

5、流式細胞儀

三、實驗步驟

1、收集細胞{數目約（1~ 5）×106個/mL｝，500~ 1000 r/min離心5min，棄去培養液。

2、3ml PBS洗滌1次。

3、離心去PBS，加入冰預冷的70%的乙醇固定，4℃，12小時。

4、離心棄去固定液，3mlPBS重懸5min。

5、400目的篩網過濾1次，5001000r/min離心5min，棄去PBS。

6、用1ml PI染液染色，4℃避光30min。

7、流式細胞儀檢測：PI用氬離子激發熒光，激光光波波長為488nm，發射光波波長大于630nm，產生紅色熒光分析PI熒光強度的直方圖也可分析前散射光對側散射光的散點圖。

8、結果判斷：在前散射光對側散射光的散點圖或地形圖上，凋亡細胞與正常細胞相比，前散射光降低，而側散射光可高可低，與細胞的類型有關;在分析PI熒光的直方圖時，先用門技術排除成雙或聚集的細胞以及發微弱熒光的細胞碎片，在PI熒光的直方圖上，凋亡細胞在G1/G0期前出現一亞二倍體峰。如以G1/G0期所在位置的熒光強度為1.0，則一個典型的凋亡細胞樣本其亞二倍體峰的熒光強度為0.45，可用雞和鮭魚的紅細胞的PI熒光強度做參照標準，兩者分別為0.35和0.7，可以確保在兩者之間的不是細胞碎片而是完整的細胞。

四、注意事項

細胞凋亡時，其DNA可染性降低被認為是凋亡細胞的標志之一，但這種DNA可染性降低也可能是因為DNA含量的降低，或者是因為DNA結構的改變使其與染料結合的能力發生改變所致。在分析結果時應該注意。

二、Pi電動滑臺是做什么用的？具體一點

電動滑臺是直線滑臺的一種，工業上又常稱為電動缸，線性模組等，由直線滑臺與馬達驅動的結合構成。通過馬達驅動實現帶動工件自動線性運動。通過多方向軸的組合，組成設備上的運動執行機構，這種機構常被稱為：工業機械手、XYZ軸機械手、坐標軸滑臺等。

Pi電動滑臺廣泛使用，例如：1、娛樂行業：機械人手臂及關節，動感座椅等。2、軍工行業：模擬飛行器，模擬仿真等。3、汽車行業：壓裝機，測試儀器等。4、工業行業：食品機械，陶瓷機械，焊接機械，噴涂設備，升降平臺等。5、醫療器械。

三、pi是什么意思？

在日常生活中隨處可見的英文縮寫，每一個英文縮寫代表的含義和作用都不一樣，而在外貿中pi這個英文讓人費解，究竟這個pi在商貿往來中代表些什么意思呢？pi的作用又會是什么樣的呢？想必大家和我一樣苦惱，接下來讓我們一同了解下pi的作用和意思吧。

簡要回答 PI = Proforma Invoice 形式發票, 估價發票, 試算發票, 備考貨單。

詳細內容 作用：

1.讓客戶知道自己買的什么，數量多少，單價多少以及總值；

2.客戶用抄以辦理申請開立信用證或其他付款方式的單據。

形式發票Proforma Invoice (PI) 其作用等同于報價單!做好報價單就能安排生產嗎?那做貿易不襲是太簡單啦?

形式發票只有經過雙方簽字后,就意味著合同生效!—C但僅僅百合同生效,也不一定就要安排生產——通常要等LC或者預付款收到以后才能安排生產的!

Proforma Invoice做好后還不能安排生產的.它的另一作用就作合同之用.需雙方蓋章度(stamp)才能生效!我的英國客戶每次都喜歡用PI的形式作合同之用,而且當他收到PI后都會付訂金的!

形式發票還可以用于其他需要結算的場合。

(1)用于預付貨款，即在裝貨前要求現金支付。

(2)在寄售方式中，出口的貨物沒屬有確定的銷售合約，而是放在代理商手中，對代理商來說，形式發票可以作為向潛在的買方報價的指南。

(3)如果是投標，形式發票可以使買方在許多相互競爭的供貨商中按合理的價格和銷售條件簽訂銷售合同。

“Proforma”是拉丁文，它的意思是“純為形式的” 。所以單從字面來理解，Proforma Invoice 是指純為形式的, 無實際意義的發票。這種發票本來是賣方在推銷貨物時，答為了供買方估計進口成本，假定交易已經成立所簽發的一種發票。實際上，并沒有發出貨物的事實，正因為如此，這種發票也被稱之為“試算發票”。